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Monitorização na maternidade
Para determinar se uma exploração é estável ao PRRSV, deve-se confirmar que não nascem leitões virémicos. A transmissão transplacentária do PRRSV é altamente eficiente, principalmente no final da gestação e, portanto, se houver virémia nas reprodutoras, provavelmente ocorrerá infecção do feto no útero .
Para isso, a maternidade deve ser monitorizada. Idealmente, os leitões devem ser testados no nascimento, mas devido à dificuldade de amostrar esses animais, os animais são frequentemente testados pouco antes do desmame. Se os resultados forem negativos, eles confirmam a ausência de circulação do vírus nas reprodutoras. Se forem positivos, devem ser colhidas amostras ao nascer para determinar se os leitões nasceram infectados ou foram infectados por contaminação cruzada durante a lactação.
A amostra de referência para a determinação da presença do vírus é o soro. Inicialmente devem ser recolhidas amostras de sangue de um total de 30 leitões, o que nos permitiria detectar uma prevalência de 10% com um nível de confiança de 95% em amostras aleatorias. Ao amostrar animais com sinais de doença a sensibilidade estima-se que é maior. Em situações de muito baixa circulação vírica, como as etapas finais de um programa de estabilização ou explorações consideradas estáveis clinicamente, esta intensidade de amostragem pode não ser suficiente e recomenda-se aumentar o tamanho da amostra para 60, o que permite detectar prevalências de 5% ou superiores. Devido ao baixo nível de circulação vírica, devem ser realizadas amostragem sistemáticas e seriadas durante longos periodos de tempo já que é possível que após vários meses de resultados negativos seja encontrada alguma amostra positiva. Deveriam ser monitorizados, no mínimo, os leitões de um ciclo reprodutivo completo após serem encontrados resultados negativos.
Perante a dificuldade para recolher amostras de sangue em animais jovens, o impacto no seu bem-estar e o elevado tamanho da amostra necessário para detectar prevalências tão baixas, foram desenvolvidos sistemas de amostragem alternativos. Uma opção é a utilização dos fluídos de processamento, correspondentes ao exudado a partir dos testículos e caudas. Dado que este exudado é composto fundamentalmente de plasma e sangue, é possível encontrar o vírus quando os leitões são virémicos, pelo que constitui uma boa opção para aumentar o tamanho da amostra, mantendo uma boa sensibilidade em comparação com a análise de amostras de soro. Há que ter em conta que o uso de fluídos de processamento apenas é válido nas explorações onde se pratica a castração sistemática. Nos fluídos procedentes apenas de caudas cortadas, a sensibilidade é muito mais baixa e insuficiente para poder determinar com fiabilidade o estatuto da exploração (Vilalta et al., 2018).
A obtenção de sangue procedente dos cordões umbilicais demonstrou ser uma opção viável para a detecção de PRRSV em leitões recém-nascidos
(Martin-Valls et al., 2018). Embora a amostra seja mais fácil de ser obtida, ela deve ser recolhida no momento do nascimento e deve-se levar em consideração a contaminação ambiental. No entanto, é uma alternativa confiável que permite fácil monitorização da maternidade e é preferível aos fluidos de processamento obtidos apenas da cauda.
Os fluidos orais também foram identificados como uma amostra válida. O problema neste caso é que os leitões em lactação não costumam sentir-se atraídos pelas cordas, por isso o tempo de amostragem é longo e a representatividade da ninhada é baixa, o que os torna uma opção não viável. Para tentar melhorar a utilidade da técnica, optou-se por incluir a mãe, nos chamados fluidos familiares, já que o exemplo da mãe incentiva os leitões a morderem a corda e aumenta a sensibilidade da técnica. No entanto, é um sistema em estudo que não é considerado a melhor opção.
Além disso, foi descrita a possibilidade de recolher amostras da superfície do úbere da porca utilizando toalhitas impregnadas em líquido com o raciocínio de que, se os leitões estiverem infectados, excretarão o vírus em fluídos orais e contaminarão o úbere. Embora existam poucas experiências e seja cedo para avaliar o valor deste sistema, os resultados são animadores, assim como os obtidos com a amostragem de superfícies da sala de lactação. Neste caso, porém, como já foi indicado para o cordão umbilical, é possível obter amostras positivas de ninhadas negativas, o que indica a detecção de RNA viral de contaminação ambiental, portanto a interpretação dos resultados deve ser criteriosa (Vilalta et al, 2019).
Por último, está a ser estudada a possibilidade de utilizar colheitas de amostras agregadas de partes de cadáveres, especialmente línguas, para determinar a presença ou ausência do vírus em animais nascidos mortos (Baliellas, 2020).
Monitorização de reprodutoras
Outro ponto fundamental é a análise das porcas de reposição. Isso deve incluir uma amostragem na entrada e outra na saída da quarentena utilizando ELISA e RT-PCR para confirmar seu estado sanitário, monitorizar a eficiência da adaptação e saber o momento da infecção, caso ela ocorra. Convém utilizar ferramentas como a sequenciação para confirmar a identidade dos vírus encontrados durante o periodo de adaptação (i.e. vacinal ou estirpe de campo). Embora não seja suficiente confirmar que as porcas não representam um risco para a exploração, devemos verificar que, pelo menos, elas não são virémicas ao entrarem nas instalações de gestação.
Por outro lado, a monitorização das reprodutoras é extremamente difícil. A sorologia é de valor escasso já que não existem vacinas marcadas no mercado, os valores S/P são altamente variáveis entre indivíduos e dependentes, por sua vez, da estirpe que causa a infecção (Kim et al., 2007) e os animais permanecem seropositivos durante muitos meses. Além disso, frequentemente não ocorre uma resposta secundária após a reinfecção e, quando ocorre, é muito rápida, razão pela qual a colheita de amostras pareadas costuma ser de pouca utilidade para determinar a recirculação do vírus. Da mesma forma, a monitorização por RT-PCR não é prático, uma vez que o número de animais virémicos num determinado momento é muito baixo e a virémia em animais adultos com imunidade prévia é muito curta. Tudo isso significa que, na prática, a capacidade de detecção é muito baixa e não vale a pena.
Em função de tudo o anteriormente comentado podemos concluir que a monitorização das porcas em produção apenas é útil nas explorações negativas e para o diagnóstico de surtos da doença.
Pelo contrário, a monitorização de animais em crescimento é bastante fácil e pode ser utilizada quase qualquer amostra e técnica. A única consideração seria utilizar um tamanho de amostra e um sistema de amostragem que permita obter uma boa representatividade da população estudada em função do nível de prevalência esperado.
