Controlo de estreptococos numa exploração de produção, uma experiência de campo

Introdução

Atualmente, os estreptococos, juntamente com a diarreia colibacilar, são as duas patologias mais recorrentes tanto na fase de lactação como na fase de transição, sendo também responsáveis por importantes perdas na indústria suinícola. Neste novo cenário de produção, a profilaxia vacinal e a higiene são algumas das melhores medidas que podem ser adoptadas para controlar ambos os processos patológicos.

Caso clínico

Este caso clínico tentará explicar a abordagem ao controlo dos estreptococos num cenário atual, em que a redução dos antibióticos está cada vez mais presente.

Trata-se de uma exploração comercial em fase 1 de produção (produção de leitões de 6 kg) com um censo de 2000 reprodutores numa zona de elevada densidade suína no sudeste de Espanha. Inicialmente, a exploração recebia substitutos de diferentes origens, mas nos últimos anos a entrada de futuros reprodutores tem-se mantido a partir da mesma origem, a exploração de reprodução da própria empresa.

Na fase I desta origem, foram frequentes os sinais clínicos de doença estreptocócica nos leitões. As principais expressões clínicas foram a artrite ao longo da lactação, tanto nos membros anteriores como nos posteriores, e a meningite principalmente no final do período de lactação (a partir dos 23 dias). A percentagem de baixas e de não recuperação variou de 1,5 a 2% na maternidade.

Video: 1. Artrite em leitões na jaula de parto.

Na fase de transição, aparecendo como casos isolados ou surtos, a meningite, a artrite e/ou a pneumonia eram também comuns, podendo também expressar-se como choque septico afectando, neste caso, animais de condição corporal mais elevada.

Video 2. Septicémia streptococica na maternidade.

Abordagem e controlo

A mudança do cenário actual, baseado na limitação e categorização dos antibióticos e a falta de disponibilidade de ferramentas para o controlo dos estreptococos, levou à necessidade de procurar outras alternativas para o seu controlo.

Perante o problema dos estreptococos nesta exploração, o controlo foi implementado de várias formas: gestão das instalações e utilização de autovacinas. É também essencial reduzir o stress dos leitões na fase de transição e, para isso, foi aumentado o espaço disponível por leitão e melhoradas as condições mínimas de temperatura e ventilação, uma vez que as instalações mal ventiladas aumentam o risco de estreptococos. A utilização de autovacinas é uma alternativa útil para combater esta patologia, embora com algumas limitações.

Video 3. Início de meningite em leitões.

O problema fundamental do Streptococcus suis é que existem cerca de 35 serótipos diferentes e não há provas científicas de imunidade cruzada entre eles. Vários podem coexistir na mesma exploração, embora exista uma relação epidemiológica clara entre os serótipos e a origem do efectivo da exploração. Verificamos que em muitas explorações podem coexistir vários serótipos, tanto patogénicos como não patogénicos. Este facto dificulta o conhecimento do serótipo responsável pela doença e, por conseguinte, a escolha do serótipo adequado para a produção da autovacina.

Produzir uma autovacina, primeira tentativa…

Quando se tornou claro que uma das formas de controlar a doença estreptocócica era a utilização de autovacinas, pusemos mãos à obra.

Foram enviadas amostras para o laboratório para o isolamento de Streptococcus suis e, aqui apareceu um dos problemas, já que muitas destas amostras foram negativas, embora fosse evidente que o animal apresentava sinais clínicos compatíveis com doença estreptocócica. Esta experiência recordou-nos que é de vital importância saber amostrar correctamente, escolhendo os animais adequados que estejam clinicamente afectados, para conseguir uma representação dos serotipos responsáveis pela patologia na exploração. É também crucial escolher animais que não tenham sido previamente tratados com antibióticos. A recolha de amostras de animais no meio de um surto de doença é geralmente uma garantia de sucesso e a amostragem deve ser tão ampla quanto possível, abrangendo tanto os casos de maternidade como os de transição. As principais amostras de eleição são as articulações ou cabeças e o sangue com anticoagulante.

Conseguimos isolar vários serotipos de Streptococcus suis e para determinar quais deles eram patogénicos, nesta primeira tentativa, determinámos os factores de virulência. É importante saber quais os serotipos patogénicos porque, no caso desta exploração, tendo tido no início a entrada de nulíparas de várias origens, o número de serotipos de Streptococcus presentes na exploração é muito elevado.

Para a tipagem da estirpe, os principais factores de virulência determinados foram:

• Gene mrp. este gene codifica a proteína de libertação de muraminidase, mas não está claramente relacionado com a virulência da estirpe em questão;
• Gene epf. codifica o fator extracelular, embora a ausência da proteína que codifica não determine se a estirpe em questão é ou não virulenta;
• Gene sly. codifica a suilisina, uma hemolisina com características citotóxicas.

Uma vez escolhidos os serótipos considerados patogénicos, procedemos à autovacinação utilizando como adjuvante o hidróxido de alumínio. Este adjuvante foi utilizado porque era o único disponível no laboratório.

Vacinámos todos todo o efectivo reprodutor da exploração em massa e revacinámo-los após um mês. Foi decidido efectuar a vacinação em massa com o objectivo de reduzir a pressão infecciosa sobre os animais.

No entanto, os resultados não foram os esperados, uma vez que as manifestações clínicas não foram reduzidas nem na fase I nem na fase II.

Video 4. Estreptococia nas jaulas de parto.

Produzir uma autovacina, segunda tentativa…

Convencidos de que as autovacinas devem ter um efeito positivo no controlo dos estreptococos, uma vez que as utilizamos para outras patologias e são de grande ajuda, decidimos tentar novamente, modificando algumas partes do processo de obtenção das mesmas.
As amostras foram enviadas para isolamento do agente patogénico da mesma forma que no caso anterior.

Uma vez isolado o Streptococcus suis, além de determinar os factores de virulência, determinou-se a sequência tipo de cada serotipo.

É importante determinar os factores de virulência, mas não são os únicos a esclarecer, pois há estirpes que não contêm alguns dos factores de virulência e são extremamente patogénicas.

Tabela 1. Estirpes de Streptococcus suis isoladas tanto na maternidade como na transição para a produção da autovacina (Fonte: Elaboração própria)

Os antigénios polissacáridos da cápsula foram determinados após a tipagem de alguns factores de virulência para determinar se a estirpe é patogénica ou não. Esta determinação é feita com tecnologia molecular através da realização de qPCR nos diferentes genes que codificam os principais factores de virulência.

A identificação molecular da estirpe através da realização de tipagem de sequências multilocus (ST: sequence type) permite-nos tipar a bactéria e, por conseguinte, compará-la com estirpes identificadas como patogénicas, nos casos em que identificamos várias estirpes na nossa amostragem. Esta técnica laboratorial é altamente normalizada e pode fornecer informações muito precisas sobre a patogenicidade de estirpes previamente isoladas.

Como mencionado anteriormente, devemos avaliar tanto os factores de virulência como o tipo de sequência de cada uma das nossas estirpes e escolher as que são mais patogénicas.

Depois de escolher as estirpes, é importante não exceder o número de estirpes a incluir na autovacina, para evitar instabilidade.

Para além da escolha das estirpes de maior interesse patogénico, a escolha do adjuvante é fundamental, uma vez que é essencial para gerar uma resposta imunitária adequada no animal. Vários estudos sustentam que a utilização de hidróxido de alumínio como adjuvante não é uma boa opção, uma vez que não é evidenciada qualquer resposta humoral no animal, sendo mais imunogénicos os adjuvantes oleosos (M. Gottschalk et al., 2022).

Uma vez obtida a autovacina com este novo protocolo de seleção de estirpes e com o novo adjuvante, voltámos a vacinar o efetivo reprodutor da exploração com a vacina e a revacinar às 3-4 semanas. Para além da vacinação de porcas produtivas, foi estabelecido um protocolo de vacinação para porcas de substituição durante o período de aclimatação na exploração, aplicando 2-3 doses durante a fase de criação.

Com esta segunda tentativa, conseguimos reduzir quase completamente a expressão clínica do estreptococo na lactação. O seu aparecimento é também ligeiramente retardado no período de transição, no qual, embora apareçam casos, o número de antibioticoterapias contra o estreptococo é reduzido e conseguimos controlar mais eficazmente os sintomas clínicos.

Actualmente, a exploração continua com a autovacinação, vacinando todos os reprodutores em massa de acordo com a clínica da exploração e continuando com a vacinação das nulíparas três vezes durante a sua aclimatação sanitária. É importante controlar os casos que surgem para se certificar de que os serótipos não variam.

Conclusões

Para que uma autovacina funcione:

• A amostragem deve ser tão alargada quanto possível, de modo a obter o maior número possível de estirpes responsáveis pela doença na exploração.
• Estabelecer um rastreio prévio através da serotipagem e da detecção de factores de virulência.
• Efectuar sequências de tipo nos casos em que existam várias estirpes, a fim de diferenciar as estirpes patogénicas das estirpes oportunistas existentes na exploração.
• Existir uma ligação epidemiológica importante entre a exploração de multiplicação de origem e a exploração de produção.
• Certificar-se sobre o adjuvante utilizado na vacina para garantir uma resposta imunitária adequada.
• Estabelecer o protocolo de vacinação adequado na exploração, no qual as nulíparas têm que ser um agente fundamental uma vez que costumam ser elas as que mais trasmitem a infecção à sua descendência.